蔬菜水果中氯吡脲的检测——SPE-UPLC-MS/MS法解决方案 氯吡脲是一种新型的植物生长调节剂,被广泛应用于苹果、西红柿、黄瓜、西瓜等水果和蔬菜生产,以促进果实肥大、提高产量、保鲜等。我国规定西瓜、黄瓜中氯吡脲最高残留限量为 0.1 mg/kg,猕猴桃、葡萄中氯吡脲最高残留限量为 0.05 mg/kg,而其它水果、蔬菜中氯吡脲最高残留限量尚未制定标准。 方法优势 (1) 采用乙腈提取,ProElut NH2固相萃取柱净化,UPLC-MS/MS检测; (2) 具有前处理简单,回收率高,除杂效果明显、方法重现性好等优点; (3) 方法定量限4.0 μg/kg。 蔬菜水果中氯吡脲的检测——SPE-UPLC-MS/MS法 1、适用范围 本方案适用于黄瓜、苹果和西红柿中氯吡脲的检测。方法定量限是4.0 μg/kg。 2、 标准品配制 (1) 氯吡脲储备液1.0 mg/mL,准确称取氯吡脲原药,用甲醇配制成1.0 mg/mL的储备液。 (2) 中间液混标0.5 μg/mL,吸取一定体积氯吡脲储备液,用甲醇配制成0.5 μg/mL的中间液。 3、提取 (1) 称取5.0 g样品,加入20 mL乙腈,振荡5 min,加入3 g NaCl,振荡5 min,6000 rpm下离心2 min; (2) 取10 mL上清液于10 mL氮吹管中,将上清液50 ℃水浴条件下氮吹至干; (3) 向氮吹管中加入1 mL 1%氨水,涡旋至完全溶解,加入5 mL二氯甲烷,涡旋2 min,4000 rpm离心 2 min,取下层清液待净化。 4、净化—— ProElut NH2 500 mg/6 mL(Cat.# 63305) (1)活 化: 依次用5 mL甲醇、5 mL二氯甲烷活化; (2)上 样: 加入待净化液,弃去流出液; (3)淋 洗: 加入5 mL二氯甲烷,弃去流出液; (4)洗 脱: 加入5 mL 30%甲醇二氯甲烷溶液,收集流出液; (5)重新溶解: 将洗脱液在50 ℃下氮吹至干,用乙腈定容至1 mL,上机分析。 5、色谱条件 UPLC 条件: 色谱柱:Leapsil C18 100 × 2.1 mm 2.7 μm (Cat.# 86005) 流 速:0.3 mL/min 进样量:5 μL 柱 温:35 ℃ 流动相:乙腈:0.1%甲酸水=4:6
质谱条件:
电离模式:ESI 扫描方式:正离子扫描
检测方式:多反应监测 电喷雾电压:5500 V
雾化气压力:50 psi 辅助气压力:50 psi
气帘气压力:20 psi 离子源温度:500 ℃ 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 表1 氯吡脲的定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞气能量
药物名称 定性离子对 定量离子对 碰撞气能量/eV 去簇电压/V
(m/z) (m/z)
(母离子/子离子) (母离子/子离子)
氯吡脲 248.0/128.9 248.0/128.9 24.57 63
248.0/154.9 19.81
248.0/94.1 21.28 6、添加回收结果 表2 蔬菜和水果中氯吡脲检测的添加回收结果
回收率(%)
添加浓度为4.0 μg/kg,加标量:0.5 μg/mL,加40 μL
黄瓜 西红柿 苹果
氯吡脲 90.70 97.16 86.10 蔬菜水果中氯吡脲的检测——SPE-UPLC-MS/MS法相关产品信息
货号 名称 规格
样品前处理
63305 ProElut NH2 500 mg/6 mL 30/pk
244358 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 12位
4803 1,3,6 mL柱管通用连接器 15/pk
4806 考克(控制流量) 15/pk
99011 真空/正压两用泵,无油 1/pk
99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米, 2 L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk
30039 FitMax针头式过滤器 Nylon 13 mm, 0.22 μm 100/pk
30040 FitMax针头式过滤器 Nylon 13 mm, 0.45 μm 100/pk
色谱柱及保护柱
86005 Leapsil C18 UHPLC/HPLC兼容反相色谱柱 100 x 2.1 mm,2.7 μm
标准品
12-S-12010A1-1ML 氯吡脲[68157-60-8] 100 μg/mL溶于乙腈1 mL
HPLC溶剂缓冲盐离子对试剂
50102 甲醇 HPLC级 4 L
50101 乙腈 HPLC级 4 L
50117 二氯甲烷 HPLC级 4 L
50144 甲酸 HPLC级 50 mL
通用色谱产品
52401B 瓶架/蓝色 50孔
52401A 瓶架/白色 50孔
1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2 mL, 100/pk
1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk
H80465 HPLC 进样针 25 μL |